الرحلان الكهربائي ثنائي الابعاد
الرحلان الكهربائي للهلام ثنائي الأبعاد (2D) هو تقنية يستخدمها العلماء لفصل وتحليل مخاليط البروتين عن طريق فصل حزم البروتين أولاً على محورين مختلفين. هذه هي الطريقة الأكثر استخدامًا عند العمل بمزائج معقدة أو سميكة من البروتينات ، غالبًا مع أحجام بروتين متداخلة يختلف الرحلان الكهربائي للهلام ثنائي الأبعاد عن الرحلان الكهربائي للهلام أحادي الأبعاد لأن الطريقة الأولى تستخدم فصل البروتين بناءً على خاصيتين مختلفتين للبروتين ، بينما يفصل الرحلان الكهربائي للهلام أحادي الأبعاد البروتينات بناءً على خاصية واحدة ، مثل حجم البروتين.
غالبًا ما يستخدم الرحلان الكهربائي للهلام في البحث لفصل الجزيئات باستخدام حقيقة أن العديد من الجزيئات البيولوجية ، مثل الحمض النووي ، لها شحنة كهربائية. يمكن استخدام هذه الحقيقة لصالح العلماء ، حيث يمكن فصل الجزيئات المشحونة في الحجم من خلال ركيزة مسامية مثل الاغاروز عن طريق تطبيق تدرج الجهد عبر هلام أيوني مسامي. بمرور الوقت ، سوف تمر الجزيئات عبر هذا الهلام إلى شحنة معاكسة للشحنة الطبيعية للجزيء. الجزيئات الصغيرة والجزيئات عالية الشحنة تتحرك أسرع من الجزيئات الكبيرة أو البروتينات ضعيفة الشحنة. في الرحلان الكهربائي للهلام ثنائي الأبعاد ، بعد فصل البروتينات بواسطة خاصية واحدة تؤدي إلى التدرج اللوني ، يمكن بعد ذلك تدوير الهلام بشكل جانبي لفصل هذه النطاقات التي تم الحصول عليها مسبقًا بناءً على الخاصية الثانية.
غالبًا ما يستخدم الرحلان الكهربائي للهلام ثنائي الأبعاد الشحنات الجزيئية للبروتينات كواحدة من الخصائص التي يمكن من خلالها فصل مجاميع البروتين إلى بروتينات أحادية المكون. كتلة البروتين هي خاصية شائعة أخرى تستخدم لفصل البروتينات في الرحلان الكهربائي للهلام ثنائي الأبعاد. بعد أن يتم تمرير البروتينات عبر الهلام عبر ممر واحد في الرحلان الكهربائي للهلام أحادي الأبعاد ، يمكن بعد ذلك طرد هذا الجل في جهاز طرد مركزي ، وسحب البروتينات الأثقل بشكل أسرع من البروتينات الأصغر والأقل حجمًا. يكون اتجاه السحب عموديًا على الاتجاه الذي تمر فيه البروتينات عبر الهلام بسبب الانجذاب إلى الشحنة الكهربائية من خلال تدرج الجهد.
يحتوي الرحلان الكهربي على العديد من التطبيقات في البحث الجزيئي ، بما في ذلك فصل البروتينات بناءً على الخصائص المركبة مثل وسم البروتين. يُستخدم فصل البروتينات بناءً على الكتلة المميزة أيضًا عندما يتم تمييز البروتينات بجزيئات أخرى. يمكن استخدام هذه الطريقة مع مجمعات البروتين هذه لأن البروتينات المصنفة سوف تخترق الهلام بسهولة أكبر من البروتينات غير المسماة.
في حين أن العديد من المواد الهلامية للفصل في المختبر مصنوعة من الاغاروز ، فإن فصل البروتين عن طريق الرحلان الكهربائي للهلام ثنائي الأبعاد يكون أفضل على المواد الهلامية بولي أكريلاميد. تستخدم هذه الأنواع من المواد الهلامية في النشاف الغربي والمقايسات الأخرى القائمة على حجم البروتين. يستخدم Agarose بشكل أكثر شيوعًا لفصل أجزاء من الحمض النووي.
 |
| صورة توضح فصل البروتينات حسب الخاصية الحمضية والقاعدية |
 |
| فصل البروتينات حسب الخاصية الحمضية و القاعدية و ايضا حسب الكتلة الجزيئي للبروتين |
ليست هناك تعليقات:
إرسال تعليق