ماهي صبغة غرام ؟

طريقة عمل صبغة جرام  

Credit jarmoluk
Pixabay.com

1-مقدمة 

كانت البكتيريا موجودة منذ فترة طويلة ؛ في الواقع ، أقدم الحفريات هي  بدائية النواة هي أقدم شكل معروف للحياة على الأرض. خلال هذا الوقت الطويل ، تطورت البكتيريا إلى مجموعات كثيرة جدا من الأنواع المختلفة. لقد تكيفوا أيضًا مع العديد من البيئات ، ولهذا السبب من المهم أن يكون لديك نظام لإدراجها. يصنف العلماء البكتيريا بشكل عام إلى مجموعتين: إلى جرام (-) و إلى جرام (+).  اذن مالفرق بينهما ؟ و لماذا صنفا هكذ؟ 

2-تعريف 

هي صبغة تستعمل في عدة خطوات بسيطة في المخبر حيث تسمح هذه الصبغة بتقسيم البكتيريا الى نوعين بكتيريا موجبة الجرام حيث تحتفظ بتلوين الكريستال البنفسجي بسبب طبقة توجد في غشائها  اما البكتيريا في حالة تلون البكتيريا باللون الوردي فهذا يعني ان البكتيريا سالبة الجرام 

3-تاريخ صبغة جرام 

تم اكتشاف صبغة جرام عام 1883 ونشرها عام 1884 ، وهي واحدة من أساسيات علم البكتيريا.

يعود اسم هذا التلوين إلى الدنماركي هانز كريستيان غرام (1853-1938). في البداية كان مساعدًا في علم النبات ، ثم تابع دراسة الطب ، وأثناء عمله على الالتهاب الرئوي والبحث عن عامله المعدي ، طور ، في غضون أسبوعين ، هذا اللون ، ولا يزال يستخدم بعد 132 عامًا

4-طريقة العمل 

1-4الادوات التي نحتاجها هي 

ساترة-صفيحة-مجهر ضوئي-ملون كريستال البنفسجي-ملون الفوشيسين- موقد بنسن- اليود-وعاء تلوين

2-1-4ادوات الحماية

مئزر-قفازات 

2-4لمراحل 

1-قم بتنقية الصفيحة عبر غسلها بماء الكلور ثم بالماء العادي 

2--قم بوضع العينة البكتيرية  على الصفحية  و ثبتها عبر تمريرها على موقد بنسن عدة مرات 

3-قم بوضع الصفيحة داخل وعاء التلوين 

4-قم بوضع الملون كريستال البنفسجي في على الصفيحة 

5-اشطفه برفق (قلل كمية الملون الذي فوق الصفيحة) 

6-قم بتغطية العينة باليود (كمحلول Lugol أو betadine ) واشطفها (يقوم بتثبيت اللون البنفسجي عبر تشكيله لمعقد lugol-violet في هيلوى البكتيريا موجبة الجرام 

7-قم بوضع مزيل اللون و في اغلب الاحيان كحول الايثانول من اجل ازالة اللون الارجواني الغير مثبت على البكتيريا جرام سالب

8-قم باضافة ملون الفوسيشين الذي يتوضع على البكتيريا سالبة الجرام و يعطيها اللون الوردي 

9-ثم مزيل اللون لا يكون قوي ثم اشطفها بالماء 

10 قم بتجفيف الصفيحة ثم ضع عليها الساترة و قم مشاهدتها في المجهر الضوئي  تكبير 400 او ضف قطرة من زيت الغمر على تكبير 1000

ملاحظة: في كل عملية تلوين اترك على الاقل دقيقة بين المرحلة التالية  

5-النتائج 

عند تكبير 100

بكتيريا جرام - بالمجهر الضوئي 

تكبير 400 

بكتيريا جرام - بالمجهر الضوئي 

بكتيريا جرام + بالمجهر الضوئي 

1-5تحليل النتائج 

تحت المجهر ، تظهر البكتيريا موجبة الجرام باللون الأزرق البنفسجي لأن غشاء الببتيدوغليكان السميك يمكن أن يحتفظ بالصبغة. تسمى البكتيريا موجبة الجرام بسبب النتيجة الإيجابية.

تحت المجهر تظهر البكتيريا سالبة الجرام باللون الوردي لان غشاءها غير سميك و يسمح بمرور اللون الوردي (فوشسين الى داخل الخلية مما يعطيها اللون الوردي) 

6-الخاتمة 

لقد مكننا تطور العلوم في مجال علم الأحياء الدقيقة من التعرف على العالم الواسع وغير المحدود للبكتيريا باعتباره يتوسع دائمًا يسمح لنا هذا التطور بتحديد نوع  البكتيريا موجبة او سالبة ، وتصنيفها بناءً على باقي البكتيريا ودور كل منها. يمكننا أيضًا من تحديد البكتيريا المفيدة والممرضة وتقديم العلاج المناسب ضد البكتيريا السامة.

للإطلاع على الفرق بين البكتيريا سالبة الغرام و موجبة الغرام اضغط هنا 

للإطلاع بشكل مفصل حول البكتيريا سالبة الغرام اضغط هنا 

للإطلاع بشكل مفصل حول البكتيريا موجبة الغرام  اضغط هنا